> Blogg > Bransjenyheter

Hva er funksjonene til ELISA-settet?

2022-12-23

ELISA-settet er basert på fast fase av antigen eller antistoff og enzymmerking av antigen eller antistoff. Antigenet eller antistoffet bundet til overflaten av den faste bæreren beholder fortsatt sin immunologiske aktivitet, og det enzymmerkede antigenet eller antistoffet beholder både sin immunologiske aktivitet og enzymaktiviteten. På tidspunktet for bestemmelsen reagerer prøven som testes (der antistoffet eller antigenet måles) med antigenet eller antistoffet på overflaten av den faste bæreren. Antigen-antistoffkomplekset dannet på den faste bæreren skilles fra andre stoffer i væsken ved vasking.

Enzymmerkede antigener eller antistoffer tilsettes, som også binder seg til den faste bæreren ved reaksjon. På dette tidspunktet er mengden enzym i den faste fasen i forhold til mengden stoff i prøven. Etter tilsetning av substratet til enzymreaksjonen, blir substratet katalysert av enzymet til å bli fargede produkter. Mengden av produktet er direkte relatert til mengden av det testede stoffet i prøven, så kvalitativ eller kvantitativ analyse kan utføres i henhold til fargedybden.

Den høye katalytiske effektiviteten til enzymer forsterker indirekte resultatene av immunresponsen, noe som gjør analysen svært sensitiv. ELISA kan brukes til å bestemme antigener, men kan også brukes til å bestemme antistoffer.

Grunnleggende prinsipper for ELISA-sett
Den bruker spesifikk reaksjon av antigen og antistoff for å koble objektet til enzymet, og produserer deretter fargereaksjon mellom enzym og substrat for kvantitativ bestemmelse. Måleobjektet kan være antistoff eller antigen.

Det er tre reagenser som er nødvendige i denne bestemmelsesmetoden:
â Fastfase antigen eller antistoff (immun adsorbent)
â¡ Enzymmerket antigen eller antistoff (markør)
â¢ substrat for enzymvirkning (fargeutviklingsmiddel)

I målingen blir antigenet (antistoffet) først bundet til den faste bæreren, men beholder fortsatt sin immunaktivitet, og deretter tilsettes et konjugat (markør) av antistoff (antigen) og enzym, som fortsatt beholder sin opprinnelige immunaktivitet og enzym. aktivitet. Når konjugatet reagerer med antigenet (antistoffet) på den faste bæreren, tilsettes det tilsvarende substratet til enzymet. Det vil si katalytisk hydrolyse eller REDOX-reaksjon og farge.

Fargenyansen den produserer er proporsjonal med mengden antigen (antistoff) som skal måles. Dette fargede produktet kan observeres med det blotte øye, optisk mikroskop, elektronmikroskop, kan også måles med spektrofotometer (enzymmerkingsinstrument). Metoden er enkel, praktisk, rask og spesifikk.

Tidligere:Introduksjon av Elisa Plate

Neste:Hvorfor lyserer cellekultur røde blodceller først?